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CAR-T細胞療法是近年來推出的新型精準靶向腫瘤治療技術，2017年美國食品藥品監督管理局（FDA）批準了2項以CD19為分子靶標的CAR-T細胞免疫藥物上市，用于治療多種B淋巴細胞白血病，從此開啟了細胞免疫治療的新紀元。經改進的CAR-T免疫療法也被用來治療實體瘤、自身免疫疾病、HIV感染和心臟病等疾病，具有廣闊的應用空間。
維真生物科研團隊經過精心研究，新推出可以穩定表達CD19抗原和copGFP的K562單克隆細胞系，該單克隆細胞系可在殺傷實驗中作為靶細胞，評估CAR-T細胞對腫瘤細胞的殺傷力；同時該單克隆細胞系攜帶GFP熒光，可通過流式鑒定GFP的陽性率來檢測殺傷效果，從而減少抗體的使用，為客戶進行CD19-CAR-T細胞的體外功能性驗證帶來了極大的方便。
產品名稱：K562-CD19-GFP單克隆細胞系
產品貨號：CL852678
產品優勢： ①穩定表達CD19抗原和copGFP，可作為殺傷實驗中有效的靶細胞； ②帶有GFP熒光，減少后期殺傷效果檢測中抗體的使用，節約成本；
數據支持：
▽ 單克隆細胞鑒定實驗 ▽
K562細胞與K562-CD19-GFP單克隆細胞中CD19與GFP表達量的鑒定
▽ 結 果 ▽
用流式細胞術分別對K562細胞和K562-CD19-GFP單克隆細胞中CD19和copGFP的表達量進行檢測，檢測結果表明，K562-CD19-GFP單克隆細胞中CD19表達量為100%，GFP表達量為99.4%。
經鑒定，該研究成功構建了能夠穩定表達CD19和GFP的單克隆細胞株 K562-CD19-GFP。
產品名稱：CD3-CD19（BiTE雙抗）
貨號：AB000006
作用原理：
CD3-CD19 BiTE是一種雙特異性T細胞連接蛋白，該蛋白可以連接T細胞和CD19陽性細胞，使T細胞可以選擇性接近靶細胞進而達到特異性殺傷的效果。BiTE分子是一種融合蛋白，BiTE由兩個單鏈可變片段（scFv）組成，通過柔性融合接頭串聯連接。一個scFv識別T細胞表面蛋白CD3，另一個scFv識別特異性腫瘤細胞表面抗原。
CD3-CD19雙抗不僅是簡單的把T細胞與腫瘤細胞相結合，其通過與T細胞表面CD3受體相結合形成復合物，進一步激活T細胞信號通路，使T細胞表達CD69、CD25，上調細胞黏附分子（CD2）、短暫釋放炎癥因子，令T細胞活化，促使T細胞增殖，進而引起腫瘤細胞溶胞而死亡。
CD3-CD19雙特異性抗體作用機制（Krishnamurthy A et al. Pharmacol Ther, 2018.）
流式檢測抗體與T細胞結合活性
效應細胞：激活的T細胞
靶細胞：K562-CD19-GFP單克隆細胞
實驗方法： 按照靶細胞每孔1*10^4個，效應細胞每孔1*10^5個（效靶比為10：1）分別加至96孔板中，再加入CD3-CD19雙特異性抗體進行殺傷實驗。
實驗共設置5個梯度，分組如下：
GFP陽性細胞存活率檢測
▽ 結果分析：
殺傷24 h后進行流式鑒定，觀察GFP陽性細胞的存活率。結果表明，T細胞對K562-CD19-GFP單克隆細胞有很好的殺傷效果，（效應細胞對靶細胞）殺傷率可高達94%，且在一定濃度范圍內，GFP陽性細胞的數量與抗體濃度呈負相關。
綜合上述研究結果，我們得出以下結論：本研究成功構建了一株單克隆穩轉細胞系K562-CD19-GFP，而且利用CD3-CD19雙特異性抗體進行的殺傷實驗表明，該細胞株能作為T細胞殺傷實驗中的有效靶細胞，這一細胞株為客戶進行CD19-CAR-T細胞的體外功能性驗證帶來極大的方便。
本研究中成功構建的K562-CD19-GFP單克隆細胞系，和所使用的CD3-CD19 BiTE雙特異性抗體，維真均可為您提供，兩者可結合使用，評估效應T細胞的殺傷效率；此外，CD19與copGFP共表達的病毒我們也有現貨供應，好物低價，任您選擇。真誠歡迎各位新老客戶咨詢訂購！熱線電話：400-077-2566。
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