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4in1 shRNA克隆案例分享

胃(wei)癌(ai)是侵(qin)襲性(xing)極(ji)強的(de)惡性(xing)腫(zhong)瘤(liu)之(zhi)一，早期(qi)診斷率低(di)，轉移率高(gao)(gao)。盡管胃(wei)癌(ai)在(zai)治(zhi)療方面(mian)已經取得了(le)一定的(de)進展，但為(wei)了(le)尋求(qiu)更佳的(de)治(zhi)療手段(duan)，需(xu)要(yao)更好地了(le)解其潛(qian)在(zai)發(fa)病機(ji)制(zhi)和新的(de)治(zhi)療靶點。驅動蛋白超(chao)家(jia)族23基(ji)因（KIF23），在(zai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)質分離、軸突生長等多種細(xi)(xi)胞(bao)(bao)過程中發(fa)揮重(zhong)要(yao)作(zuo)用。目前，KIF23已被發(fa)現(xian)(xian)在(zai)多種腫(zhong)瘤(liu)組織和細(xi)(xi)胞(bao)(bao)中高(gao)(gao)表(biao)(biao)(biao)達(da)，提示(shi)KIF23與(yu)腫(zhong)瘤(liu)發(fa)生有潛(qian)在(zai)的(de)聯系。在(zai)本篇研(yan)究，作(zuo)者發(fa)現(xian)(xian)KIF23的(de)表(biao)(biao)(biao)達(da)與(yu)胃(wei)癌(ai)的(de)不良預后(hou)相關，且與(yu)腫(zhong)瘤(liu)分期(qi)（pTNM）有關。體外實驗證明(ming)，KIF23的(de)缺失對(dui)胃(wei)癌(ai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)增(zeng)殖有明(ming)顯的(de)抑(yi)制(zhi)作(zuo)用。此(ci)外，KIF23基(ji)因敲除可(ke)顯著抑(yi)制(zhi)小(xiao)鼠胃(wei)癌(ai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)增(zeng)殖，并顯著下(xia)調腫(zhong)瘤(liu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)增(zeng)殖因子Ki67和PCNA的(de)表(biao)(biao)(biao)達(da)。綜上所述，這些數據表(biao)(biao)(biao)明(ming)KIF23可(ke)能是胃(wei)癌(ai)的(de)一個潛(qian)在(zai)治(zhi)療靶點。

02

shRNA腺病毒案例分享

據報道(dao)，跨膜蛋白173（TMEM173）重組蛋白能(neng)(neng)(neng)參與(yu)內(nei)質(zhi)網(wang)應激、炎癥(zheng)和免疫(yi)過(guo)程，這些過(guo)程都與(yu)心(xin)肌(ji)肥(fei)大密切(qie)相(xiang)關(guan)。TMEM173和自(zi)(zi)噬之間有(you)密切(qie)而(er)復(fu)雜(za)的(de)(de)聯系，但它在(zai)自(zi)(zi)噬中(zhong)的(de)(de)具體作(zuo)用還(huan)有(you)待進一(yi)步研究。在(zai)本文中(zhong)，作(zuo)者(zhe)發現與(yu)野生型C57BL/6小(xiao)鼠相(xiang)比，Tmem173基因敲(qiao)除（KO）的(de)(de)小(xiao)鼠在(zai)橫向主動(dong)脈縮窄（TAC）6周(zhou)后表現出更嚴重的(de)(de)肥(fei)大、纖維化、炎性浸潤(run)和心(xin)臟功能(neng)(neng)(neng)障(zhang)礙。透射電鏡和蛋白質(zhi)水平(ping)顯示(shi)KO小(xiao)鼠心(xin)肌(ji)自(zi)(zi)噬小(xiao)體降(jiang)解(jie)受到抑制(zhi)。另外，苯腎上腺素處理(li)的(de)(de)乳鼠心(xin)肌(ji)細胞的(de)(de)體外實驗表明(ming)，Tmem173基因的(de)(de)豐度與(yu)Lc3-Ⅱ的(de)(de)豐度和反映自(zi)(zi)噬體降(jiang)解(jie)能(neng)(neng)(neng)力的(de)(de)紅色和黃色熒光(guang)點(dian)數呈負(fu)相(xiang)關(guan)。這些結果(guo)表明(ming)，TMEM173可以改善自(zi)(zi)噬通量(liang)，并對(dui)壓(ya)力超負(fu)荷所致的(de)(de)心(xin)肌(ji)肥(fei)厚具有(you)保護作(zuo)用，暗示(shi)其可能(neng)(neng)(neng)成為未來治療(liao)心(xin)肌(ji)肥(fei)厚的(de)(de)潛(qian)在(zai)靶點(dian)。

Tmem173下調對體外PE誘導的心肌細胞肥大的影響

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4in1 shRNA腺病毒案例分享

敲(qiao)低PFKFB3的(de)表達可降低成熟破骨細胞的(de)數(shu)量大(da)小且損壞F-肌(ji)動蛋白環(huan)

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4in1 shRNA慢病毒案例分享

在多(duo)種乳腺癌細胞中敲低USP14的(de)表達

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mir30-based shRNA AAV案例分享

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誘導性shRNA AAV案例分享

伏隔核神經元cAMP調控血腦屏障完整性和(he)抑(yi)郁敏感性

中(zhong)國藥(yao)科大學(xue)(xue)的(de)(de)研究人員通過(guo)代謝組學(xue)(xue)分(fen)析(xi)等手段對壓力應激(ji)誘導(dao)抑郁(yu)的(de)(de)小鼠(shu)模型(xing)進行研究，發(fa)現(xian)(xian)cAMP在NAC中(zhong)特異性降(jiang)低，并與抑郁(yu)程(cheng)度呈正相(xiang)關，在NAC中(zhong)補(bu)(bu)充(chong)cAMP可以(yi)改(gai)善BBB的(de)(de)完(wan)整性和抑郁(yu)樣(yang)行為。RNA-Seq分(fen)析(xi)發(fa)現(xian)(xian)，cAMP下降(jiang)主要是因為其合成酶Adcy5受抑制(zhi)，且此過(guo)程(cheng)只發(fa)生(sheng)在神經(jing)元細胞(bao)中(zhong)。通過(guo)降(jiang)低NAc中(zhong)Adcy5的(de)(de)表達，內(nei)源性調(diao)節神經(jing)元內(nei)cAMP合成，可調(diao)節對社會應激(ji)的(de)(de)敏感性。此外(wai)(wai)，NAc腦區cAMP不(bu)足降(jiang)低了(le)(le)胞(bao)外(wai)(wai)基質(zhi)蛋白reelin的(de)(de)表達，外(wai)(wai)源補(bu)(bu)充(chong)后促進了(le)(le)BBB完(wan)整性，并改(gai)善了(le)(le)抑郁(yu)樣(yang)行為。上述結果表明(ming)，神經(jing)元cAMP可能通過(guo)Reelin介導(dao)的(de)(de)細胞(bao)外(wai)(wai)基質(zhi)信號調(diao)節NAC血腦屏障(zhang)完(wan)整性的(de)(de)分(fen)子機制(zhi)，為抑郁(yu)癥的(de)(de)防治(zhi)提供(gong)了(le)(le)新思路。

伏隔核內神經元(yuan)CAMP合成內源性調節后(hou)的行為變化