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維真生物采用的包裝系統是2代包裝系統，即三質粒系統，該系統包括1個包裝質粒(psPAX2)、1 個包膜質粒(pMD2G)、1個目的基因質粒和1株包裝細胞(293T cell)。下圖是2代慢病毒包裝系統的示意圖：

維真生物可以提供從LV質粒構建至病毒包裝的所有服務外包項目。而且，維真生物全套的LV載體和表達系統可用于體內和體外表達human/mouse/rat ORFs，lncRNA，circRNA，shRNAs和CRISPR/gRNA。下面是LV從頭合成的流程：

維真生物采用蔗糖密度梯度超速離心法對LV病毒進行純化。它利用不同顆粒之間存在的沉降系數差，在一定離心力作用下，顆粒各自以一定速度沉降，在密度梯度不同區域上形成區帶。下圖是LV病毒純化的示意圖：

維真生物的LV病毒采用孔稀釋法進行標定。

 孔稀釋法是通過數熒光的方法測定慢病毒滴度，得到的結果為有感染能力的慢病毒顆粒數。下圖是維真某慢病毒(3.20×108TU/mL)孔稀釋法測滴度時的熒光圖：

慢病毒包裝服務詢價單（點擊下載）

1、什么情況下選用慢病毒？

 慢病毒的宿主范圍比較廣，既能感染分裂細胞，也能感染非分裂的細胞，在體內外研究中均可選擇慢病毒作為病毒載體。此外，慢病毒也是構建穩轉株的理想病毒。

2、慢病毒載體可插入多大的 ORF 片段？

 一般情況下，慢病毒載體可容納6 kb插入片段。然而，插入的ORF基因大于3 kb時會大大降低病毒的包裝效率，進而影響病毒滴度甚至基因表達。

3、用于慢病毒感染的細胞接種量是多少？

將狀態良好的目的細胞接種到24孔板，細胞濃度一般為1×10⁵/mL細胞，接種細胞數量需要考慮到細胞活力因素、狀態因素、生長快慢因素、分裂因素等，一般是保證病毒感染時細胞匯合率達到50%-70%為佳。

4、什么是 MOI ？

 MOI （multiplicity of infection），即感染復數，指的是感染時病毒與細胞數量的比值。一般認為MOI是一個比值，沒有單位。

5、慢病毒是否能夠穩定表達基因？

 是的。慢病毒能將外源基因整合到宿主基因組中，不會隨著細胞分裂傳代而丟失，因此能實現外源基因的長期穩定表達。

6、維真慢病毒的包裝周期是多久？

 如果客戶提供構建好的慢病毒載體，那么包裝時間一般為2周左右，若包含前期載體構建等的時間，時間大概在5周左右。

7、慢病毒感染細胞后，目的基因的表達什么時間達到峰值？

 慢病毒感染目的細胞后，一般情況下，在72-96h目的基因的表達能達到峰值，但是對于一些特殊細胞、如增殖傳代比較慢的細胞，蛋白表達達到峰值則需要更長的時間。

8、怎樣提高慢病毒的感染效率？

 細胞良好的生長狀態和感染時適合的 MOI 值是達到高感染效率的保證。一般可以通過提高感染時的 MOI 值來提高病毒的感染效率，必要時可在感染時加入助感染試劑ADV-HR來提高慢病毒的感染效率。

9、慢病毒感染后，細胞狀態很差，甚至出現死亡，為什么？

 慢病毒會對細胞造成一定的毒性，不同細胞對毒性的耐受力不同。建議調整并降低感染時使用的MOI值，即可在細胞準備時增加鋪板細胞的匯合率（可提高至 70%），調整感染時加入的病毒量。此外，還可選擇在感染4小時后換液，用新鮮的完全培養液繼續培養觀察。

10、慢病毒、腺病毒、腺相關病毒三種病毒有什么區別？如何選擇？

對于轉染困難的細胞，科研工作者通常會選擇病毒來導入目的基因。目前，腺病毒、慢病毒和腺相關病毒是常用的病毒載體工具。那么如何選擇適合您實驗體系的病毒工具，請參考下面3種病毒工具的比較：